A cura di Daniel M. Baer, MD

Conservazione delle urine

D: Sto cercando un modo semplice per conservare campioni di urina di routine che non saranno testati entro due ore dalla raccolta. Attualmente, i campioni interni nel nostro ospedale da 300 letti vengono raccolti dalle unità infermieristiche ogni due ore da un messaggero di laboratorio. Molte volte, questi esemplari hanno quasi due ore quando arrivano in laboratorio., I campioni dei nostri clienti di outreach devono essere refrigerati, ma spesso si trovano nell’area di outreach per un’ora o due prima di raggiungere la sezione di analisi delle urine.

Ho raccomandato che tutti i campioni raccolti dalle unità infermieristiche o tenuti nella sezione di sensibilizzazione siano collocati in refrigeratori di polistirolo contenenti confezioni freezer fino a quando non vengono portati nella sezione di analisi delle urine. I pacchetti freezer potrebbero essere sostituiti quotidianamente dal lab messenger. Il nostro responsabile del laboratorio non è a favore di questa raccomandazione e mi ha chiesto di cercare un conservante chimico., La ricerca di un conservante diverso dalla refrigerazione per un’analisi delle urine di routine non ha avuto successo. Cosa suggerisci?

A: Secondo le linee guida NCCLS approvate sull’analisi delle urine e la raccolta, il trasporto e la conservazione dei campioni di urina, in generale, i conservanti chimici dovrebbero essere evitati per l’analisi delle urine.1 NCCLS raccomanda di eseguire l’analisi delle urine entro due ore dalla raccolta. Se ciò non è possibile, il campione di urina deve essere refrigerato il prima possibile dopo la raccolta., Il periodo di tempo in cui un campione può essere tenuto sotto refrigerazione per un’adeguata conservazione non è stato concordato su diversi costituenti di urina rimangono invariati sotto refrigerazione per diverse lunghezze di tempo. Generalmente, l’analisi delle urine deve essere completata entro sei-otto ore dalla raccolta. La decomposizione dell’urina inizia entro 30 minuti; pertanto, idealmente, l’urina dovrebbe essere esaminata entro questo tempo. L’urina lasciata a temperatura ambiente per più di due ore è solitamente considerata inaccettabile per l’esame., La refrigerazione è generalmente adeguata per i costituenti incontrati nell’analisi delle urine di routine, ad eccezione della bilirubina e dell’urobilinogeno, che sono labili sia al calore che alla luce. La refrigerazione può provocare la precipitazione di urati o fosfati, che possono oscurare altri costituenti patologici nell’esame microscopico del sedimento urinario. Secondo NCCLS, se anche l’urina deve essere coltivata, deve essere refrigerata durante il transito e tenuta refrigerata fino alla coltura.,1

Ci sono tubi di conservazione delle urine disponibili in commercio sia per l’analisi delle urine che per la coltura che si dice conservino l’urina fino a 72 ore senza refrigerazione. Sono generalmente tappo a vite, tubi in polipropilene a tenuta stagna con fondo conico e basi indipendenti costeggiate, e ciascuno contiene una compressa conservante come l’ossido mercurico. La capacità del tubo è limitata a soli 10 ml. I tubi di coltura sono anche a fondo piatto e contengono un conservante diverso come le compresse di conservante a base di acido borico., Questi tubi non sono intercambiabili; i campioni che devono essere coltivati devono essere collocati nel tubo di coltura e i campioni per l’analisi delle urine di routine, nel tubo destinato all’analisi delle urine. I conservanti che interferiscono con uno qualsiasi dei test chimici inclusi nell’analisi delle urine di routine non sono accettabili. Poiché i tubi di conservazione sono abbastanza piccoli, un contenitore di raccolta adatto deve essere fornito al paziente per la raccolta del campione e l’urina deve essere ben miscelata e versata nel tubo di conservazione introducendo una possibilità di errore di elaborazione, più il costo aggiuntivo dei contenitori.,

Molti dei cambiamenti che si verificano nelle urine conservate a temperatura ambiente si riferiscono alla moltiplicazione dei batteri. I conservanti per l’analisi delle urine, inclusa la refrigerazione, generalmente funzionano inibendo la crescita batterica. L’uso di questi conservanti chimici si traduce in un campione inadatto alla coltura. I cambiamenti includono un aumento del pH urinario poiché l’urea viene scomposta in ammoniaca. Inoltre, i calchi tendono a decomporsi e i globuli rossi subiscono emolisi. La torbidità aumenta a causa della crescita dei batteri., Il livello di glucosio diminuisce a causa del metabolismo dei batteri, mentre i nitrati vengono convertiti in nitriti attraverso l’azione dei batteri.

Altri cambiamenti includono un oscuramento del colore delle urine, dovuto all’ossidazione di cromogeni incolori come l’ossidazione dell’urobilinogeno in urobilina, o un cambiamento di colore come la bilirubina viene ossidata a
biliverdina. Nelle urine alcaline di basso peso specifico, le cellule e i calchi iniziano a lisi. I leucociti sono particolarmente soggetti a lisi poiché l’urina si trova a temperatura ambiente., Se i campioni di urina contengono glucosio, la presenza di leucociti comporterà una diminuzione dei livelli di glucosio a causa del metabolismo delle cellule. Se sono presenti chetoni, il livello diminuirà quando l’acetone viene convertito in acqua e anidride carbonica o il chetone si volatilizza.

In sintesi, la refrigerazione sembra essere la soluzione migliore quando l’analisi delle urine non può essere eseguita entro due ore dalla raccolta., La vostra raccomandazione che tutti i campioni siano collocati in refrigeratori contenenti confezioni freezer fino a quando non vengono portati alla sezione di analisi delle urine (supponendo che sia impossibile refrigerare i campioni nel sito di raccolta) sembra essere un’alternativa accettabile all’esame entro due ore dalla raccolta.

Karen M.
Ringsrud, MT(ASCP)
Assistente professore
Dipartimento. di Medicina di laboratorio e patologia
University of Minnesota Medical School

Riferimento

1. NCCL. Analisi delle urine e raccolta, trasporto e conservazione di campioni di urina: linee guida approvate., Villanova, PA: Comitato Nazionale per Laboratorio Clinico
Norme; 2001;21(19):GP16-A2.

Documentazione della flora normale

Q: Siamo tenuti a documentare i risultati della cultura di nessuna crescita o flora normale sul foglio di lavoro della cultura, o possiamo pubblicare il rapporto senza documentazione?

A: La risposta a questa domanda è legata alla necessità di un foglio di lavoro sulla cultura. Il foglio di lavoro, che si tratti di carta o di un computer, ha due funzioni., In primo luogo, il foglio di lavoro fornisce la documentazione di tutto il lavoro svolto sulla cultura da individui precedenti, e in secondo luogo, fornisce le informazioni necessarie per ricostruire il lavoro svolto sulla cultura mesi o anni dopo.

Pertanto, il foglio di lavoro dovrebbe registrare in modo chiaro e preciso tutte le osservazioni, gli strisci, i risultati dei test, le chiamate telefoniche ai fornitori e le azioni intraprese in ogni fase del workup della cultura come richiesto dal manuale della procedura. Il manuale di procedura determina l’estensione della documentazione richiesta., Ad esempio, quando il manuale della procedura afferma che un test di solubilità biliare viene utilizzato per differenziare lo Streptococcus pneumoniae dagli streptococchi viridans nelle colture di espettorato, i risultati di tale test devono essere registrati sul foglio di lavoro. Oppure, quando la procedura richiede l’esame della piastra di coltura ogni giorno per tre giorni, dovrebbe essere fatta una notazione che indica che si sono verificati gli esami necessari. Queste notazioni assistono i diversi individui che possono lavorare sulla stessa cultura., Spesso, la documentazione dei risultati negativi sul foglio di lavoro sembra essere uno spreco di tempo prezioso, ma serve come un record che il rapporto sulla cultura è corretto in base al lavoro svolto secondo la procedura di laboratorio accettata.

David Sewell, Ph. D., ABMM
Direttore di Microbiologia
Veterans Affairs Medical Center
Portland, O

Quantitative body fluid counts

D: Attualmente offriamo conteggi cellulari su fluidi come fluidi cerebrospinali, paracentesi, fluidi sinoviali e altri fluidi., Posso vedere l’importanza di riportare sia i conteggi WBC che RBC sui fluidi cerebrospinali, ma quanto è importante un conteggio cellulare per gli altri fluidi? È accettabile segnalare i conteggi di celle in modo semiquantitativo, ad esempio, RBC 1+, 2+, ecc., per questi tipi di fluidi?

A: Attualmente, si raccomanda che i conteggi cellulari sui fluidi spinali siano determinati quantitativamente, piuttosto che stimati solo come 1+, 2+, ecc.1 Questo perché le definizioni di tali intervalli semiquantitativi non sono ancora standardizzate; pertanto, i confronti con i rapporti della letteratura potrebbero essere problematici., L’esame dei fluidi spinali per la prova di infezione, tra cui batterica vs. virale, o emorragia cerebrale, è particolarmente importante per la cura del paziente. C’è la tentazione di fare i conti delle cellule quantitative su un analizzatore ematologico, anche se i produttori potrebbero non raccomandare quel metodo. Ma con la maggiore accuratezza e precisione di questi contatori, mi aspetterei che gli studi contemporanei evitino questa obiezione. Inoltre, lo sviluppo di tecniche di citocentrifugazione per i fluidi spinali, così come altri fluidi corporei, rende questo metodo molto attraente per il conteggio differenziale., Ci sono, tuttavia, le necessità di acquistare e mantenere un ulteriore pezzo di attrezzatura e l’acquisto di dispositivi usa e getta per la preparazione di vetrini microscopici.

I conteggi di cellule quantitative su altri fluidi, come l’urina, hanno notevoli benefici. È interessante notare che i laboratori di microbiologia stanno ora utilizzando stime accurate del conteggio delle cellule sull’analisi delle urine per decidere quali campioni di urina devono essere coltivati e sono stati raggiunti significativi risparmi di tempo e risorse., Come conta su altri fluidi migliorano, si spera miglioramenti simili sarebbero trovati per altri esami fluidi.

Naturalmente, oltre al conteggio quantitativo, anche la morfologia è importante. I liquidi sinoviali occasionalmente sono presentati per l’esame e l’identificazione di tutti i cristalli diagnostici come potrebbe essere visto nella gotta o in altri tipi di artrite. Tutti questi fluidi possono plausibilmente contenere cellule maligne; pertanto, la possibilità di tali cellule deve essere tenuto a mente.

John A.
Koepke, MD.,
Professore emerito di Patologia
Duke University Medical Center
Durham, NC

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