Édité par Daniel M. Baer, MD

Conservation de l’urine

Q: Je cherche un moyen facile de préserver les échantillons d’urine de routine qui ne seront pas testés dans les deux heures suivant la collecte. À l’heure actuelle, les échantillons internes de notre hôpital de 300 lits sont prélevés dans les unités de soins infirmiers toutes les deux heures par un messager de laboratoire. Souvent, ces spécimens ont presque deux heures lorsqu’ils arrivent au laboratoire., Les échantillons de nos clients de sensibilisation doivent être réfrigérés, mais souvent ils restent dans la zone de sensibilisation pendant une heure ou deux avant d’atteindre la section d’analyse d’urine.

J’ai recommandé que tous les échantillons recueillis par les unités de soins infirmiers ou détenus dans la section de sensibilisation soient placés dans des glacières en polystyrène contenant des emballages de congélation jusqu’à ce qu’ils soient apportés à la section d’analyse d’urine. Les paquets de congélateur pourraient être remplacés quotidiennement par le messager de laboratoire. Notre chef de laboratoire n’est pas favorable à cette recommandation et m’a demandé de rechercher un conservateur chimique., La recherche d’un agent de conservation autre que la réfrigération pour une analyse d’urine de routine n’a pas été couronnée de succès. Que proposez-vous?

A: Selon les lignes directrices approuvées par le NCCLS sur l’analyse d’urine et la Collecte, le Transport et la conservation des échantillons d’urine, en général, les conservateurs chimiques doivent être évités pour l’analyse d’urine.1 NCCLS recommande que l’analyse d’urine soit effectuée dans les deux heures suivant la collecte. Si cela n’est pas possible, l’échantillon d’urine doit être réfrigéré dès que possible après le prélèvement., La durée pendant laquelle un échantillon peut être conservé sous réfrigération pour une conservation adéquate n’a pas été convenue différents constituants de l’urine restent inchangés sous réfrigération pendant différentes durées de temps. En règle générale, l’analyse d’urine doit être effectuée dans les six à huit heures suivant la collecte. La décomposition de l’urine commence dans les 30 minutes; par conséquent, idéalement, l’urine devrait être examinée dans ce délai. L’urine laissée à température ambiante pendant plus de deux heures est généralement considérée comme inacceptable pour l’examen., La réfrigération est généralement adéquate pour les constituants rencontrés dans l’analyse d’urine de routine, à l’exception de la bilirubine et de l’urobilinogène, qui sont labiles à la fois à la chaleur et à la lumière. La réfrigération peut entraîner la précipitation d’urates ou de phosphates, ce qui peut masquer d’autres constituants pathologiques lors de l’examen microscopique des sédiments urinaires. Selon les NCCLS, si l’urine doit également être cultivée, elle doit être réfrigérée pendant le transit et maintenue réfrigérée jusqu’à la culture.,1

Il existe des tubes de conservation de l’urine disponibles dans le commerce pour l’analyse d’urine et la culture qui sont censés préserver l’urine jusqu’à 72 heures sans réfrigération. Ce sont généralement des bouchons à visser, des tubes en polypropylène étanches à fond conique et des bases autoportantes plinthées, et chacun contient un comprimé conservateur tel que l’oxyde mercurique. La capacité du tube est limitée aussi peu que 10mL. Les tubes de culture sont également à fond plat et contiennent un conservateur différent tel que des comprimés de conservateur à base d’acide borique., Ces tubes ne sont pas interchangeables; les échantillons qui doivent être mis en culture doivent être placés dans le tube de culture, et les échantillons pour l’analyse d’urine de routine, dans le tube destiné à l’analyse d’urine. Les conservateurs qui interfèrent avec l’un des tests chimiques inclus dans l’analyse d’urine de routine ne sont pas acceptables. Étant donné que les tubes de conservation sont assez petits, un récipient de collecte approprié doit être fourni au patient pour la collecte de l’échantillon, et l’urine doit être bien mélangée et versée dans le tube de conservation, ce qui présente un risque d’erreur de traitement, plus le coût supplémentaire des récipients.,

De nombreux changements qui se produisent dans l’urine stockée à température ambiante sont liés à la multiplication des bactéries. Les conservateurs pour l’analyse d’urine, y compris la réfrigération, agissent généralement par inhibition de la croissance bactérienne. L’utilisation de ces conservateurs chimiques entraîne un spécimen impropre à la culture. Les changements comprennent une augmentation du pH urinaire lorsque l’urée est décomposée en ammoniac. De plus, les moulages ont tendance à se décomposer et les globules rouges subissent une hémolyse. La turbidité augmente en raison de la croissance des bactéries., Le taux de glucose diminue en raison du métabolisme par les bactéries, tandis que les nitrates sont convertis en nitrite par l’action des bactéries.

D’autres changements incluent un assombrissement de la couleur de l’urine, dû à l’oxydation de chromogènes incolores tels que l’oxydation de l’urobilinogène en urobiline, ou un changement de couleur lorsque la bilirubine est oxydée en
biliverdine. Dans les urines alcalines de faible densité, les cellules et les moulages commencent à lyser. Les leucocytes sont particulièrement sujets à la lyse car l’urine se trouve à température ambiante., Si les échantillons d’urine contiennent du glucose, la présence de leucocytes entraînera une diminution des niveaux de glucose due au métabolisme par les cellules. Si des cétones sont présentes, le niveau diminuera à mesure que l’acétone sera convertie en eau et en dioxyde de carbone ou que la cétone se volatilisera.

En résumé, la réfrigération semble être la meilleure solution lorsque l’analyse d’urine ne peut être effectuée dans les deux heures suivant le prélèvement., Votre recommandation que tous les échantillons soient placés dans des glacières contenant des emballages de congélation jusqu’à ce qu’ils soient apportés à la section d’analyse d’urine (en supposant qu’il soit impossible de réfrigérer les échantillons au lieu de collecte) semble être une alternative acceptable à l’examen dans les deux heures suivant la collecte.

Karen M.
Ringsrud, MT (ASCP)
Professeur adjoint
Département. de la Médecine de Laboratoire et de Pathologie
de l’Université du Minnesota Medical School

Référence

1. NCCLS. Analyse d’urine et Collecte, Transport et Conservation des échantillons d’urine: Lignes directrices approuvées., Villanova, PA: Comité National de Laboratoire Clinique
Normes; 2001;21(19):GP16-A2.

Documentation sur la flore normale

Q: Sommes-nous tenus de documenter les résultats de culture sans croissance ou de flore normale sur la feuille de travail de culture, ou pouvons-nous publier le rapport sans documentation?

R: La réponse à cette question est liée à la nécessité d’une feuille de travail sur la culture. La feuille de calcul, que ce soit sur papier ou sur un ordinateur, remplit deux fonctions., Premièrement, la feuille de travail fournit la documentation de tous les travaux effectués sur la culture par des personnes antérieures, et deuxièmement, elle fournit l’information nécessaire pour reconstruire le travail effectué sur la culture des mois ou des années plus tard.

Par conséquent, la feuille de travail devrait consigner clairement et avec précision toutes les observations, les frottis, les résultats des tests, les appels téléphoniques aux fournisseurs et les mesures prises à chaque étape du processus de culture, comme l’exige le manuel de procédure. Le manuel de procédure détermine l’étendue de la documentation requise., Par exemple, lorsque le manuel de procédure indique qu’un test de solubilité biliaire est utilisé pour différencier Streptococcus pneumoniae des streptocoques viridans dans les cultures d’expectorations, les résultats de ce test doivent être enregistrés sur la feuille de travail. Ou, lorsque la procédure nécessite un examen de la plaque de culture chaque jour pendant trois jours, une notation doit être faite indiquant que les examens nécessaires ont eu lieu. Ces notations aident les différentes personnes qui peuvent travailler sur la même culture., Souvent, la documentation des résultats négatifs sur la feuille de travail semble être une perte de temps précieux, mais elle sert de preuve que le rapport de culture est correct sur la base du travail effectué selon la procédure de laboratoire acceptée.

David Sewell, Ph.D., ABMM
Directeur de la microbiologie
Veterans Affairs Medical Center
Portland, OR

Dénombrements quantitatifs de fluides corporels

Q: Nous offrons actuellement des dénombrements cellulaires sur des fluides tels que les fluides céphalo-rachidiens, les paracentèses, les fluides synoviaux et d’autres fluides., Je peux voir l’importance de signaler à la fois le nombre de globules blancs et de globules rouges sur les liquides céphalo-rachidiens, mais quelle est l’importance d’un nombre de cellules pour les autres fluides? Est-il acceptable de signaler le nombre de cellules de manière semi-quantitative, par exemple RBC 1+, 2+, etc. pour ces types de fluides?

R: Actuellement, il est recommandé de déterminer quantitativement le nombre de cellules sur les fluides céphalorachidiens, plutôt que de les estimer uniquement à 1+, 2+, etc.1 En effet, les définitions de ces intervalles semi-quantitatifs ne sont pas encore normalisées; par conséquent, les comparaisons avec les rapports de la littérature pourraient être problématiques., L’examen du liquide céphalo-rachidien à la recherche de preuves d’infection, notamment bactérienne ou virale, ou d’hémorragie cérébrale, est particulièrement important pour les soins aux patients. Il y a une tentation de faire le comptage quantitatif des cellules sur un analyseur d’hématologie, bien que les fabricants puissent ne pas recommander cette méthode. Mais avec l’exactitude et la précision accrues de ces compteurs, je m’attendrais à ce que les études contemporaines évitent cette objection. En outre, le développement de techniques de cytocentrifugation pour les fluides céphalorachidiens, ainsi que d’autres fluides corporels, rend cette méthode très attrayante pour le comptage différentiel., Cependant, il est nécessaire d’acheter et d’entretenir un équipement supplémentaire et d’acheter des dispositifs jetables pour la préparation de lames microscopiques.

Le nombre quantitatif de cellules sur d’autres fluides, tels que l’urine, présente des avantages considérables. Fait intéressant, les laboratoires de microbiologie utilisent maintenant des estimations précises du nombre de cellules lors de l’analyse d’urine pour décider quels échantillons d’urine doivent être cultivés, et des économies significatives de temps et de ressources ont été réalisées., Comme les comptes sur d’autres fluides s’améliorent, nous espérons que des améliorations similaires seront trouvées pour d’autres examens de fluides.

Bien sûr, en plus du comptage quantitatif, la morphologie est également importante. Les liquides synoviaux sont parfois soumis à l’examen et à l’identification de tout cristaux diagnostiques comme on peut le voir dans la goutte ou d’autres types d’arthrite. Tous ces fluides peuvent théoriquement contenir des cellules malignes; par conséquent, la possibilité de telles cellules doit être gardée à l’esprit.

John A.
Koepke, MD.,
Professeur émérite de pathologie
Duke University Medical Center
Durham, NC

Référence