editado por Daniel M. Baer, M. D.

Urine preservation

p: estoy buscando una manera fácil de preservar las muestras de orina rutinarias que no se analizarán dentro de las dos horas posteriores a la recolección. Actualmente, un mensajero de laboratorio recoge muestras internas en nuestro hospital de 300 camas en las unidades de enfermería cada dos horas. Muchas veces, estos especímenes tienen casi dos horas de edad cuando llegan al laboratorio., Las muestras de nuestros clientes de alcance deben ser refrigeradas, pero a menudo permanecen en el área de alcance durante una hora o dos antes de llegar a la sección de análisis de orina.

he recomendado que todas las muestras recolectadas por las unidades de enfermería o mantenidas en la sección de extensión se coloquen en refrigeradores de espuma de poliestireno que contienen paquetes de congelación hasta que se lleven a la sección de análisis de orina. Los paquetes del congelador podrían ser reemplazados diariamente por el mensajero del laboratorio. Nuestro Gerente de laboratorio no está a favor de esta recomendación y me ha pedido que busque un conservante químico., La búsqueda de un conservante que no sea la refrigeración para un análisis de orina de rutina no ha tenido éxito. ¿Qué sugieres?

A: de acuerdo con las directrices aprobadas por el NCCLS sobre Análisis de orina y recolección, transporte y preservación de muestras de orina, en general, se deben evitar los conservantes químicos para el análisis de orina.1 NCCLS recomienda que el análisis de orina se realice dentro de las dos horas de la recolección. Si esto no es posible, la muestra de orina debe refrigerarse lo antes posible después de la recolección., No se ha acordado el tiempo que un espécimen puede mantenerse bajo refrigeración para una conservación adecuada sobre los diferentes componentes de la orina permanecen sin cambios bajo refrigeración durante diferentes períodos de tiempo. En general, el análisis de orina debe completarse dentro de seis a ocho horas de la recolección. La descomposición de la orina comienza dentro de los 30 minutos; por lo tanto, idealmente, la orina debe examinarse dentro de este tiempo. La orina que se deja a temperatura ambiente durante más de dos horas generalmente se considera inaceptable para su examen., La refrigeración es generalmente adecuada para los componentes encontrados en el análisis de orina de rutina, con la excepción de la bilirrubina y
urobilinógeno, que son lábiles tanto al calor como a la luz. La refrigeración puede dar lugar a la precipitación de uratos o fosfatos, que pueden oscurecer otros constituyentes patológicos en el examen microscópico del sedimento de orina. De acuerdo con NCCLS, si la orina también se va a cultivar, debe refrigerarse durante el tránsito y mantenerse refrigerada hasta el cultivo.,1

Hay tubos de preservación de orina disponibles comercialmente para análisis de orina y cultivo que se dice que preservan la orina hasta 72 horas sin refrigeración. Generalmente son tubos de polipropileno a prueba de fugas con fondos cónicos y bases independientes con faldones, y cada uno contiene una tableta conservante como óxido mercúrico. La capacidad del tubo se limita tan poco como 10mL. Los tubos de cultivo también son de fondo plano y contienen un conservante diferente, como las tabletas conservantes a base de ácido bórico., Estos tubos no son intercambiables; las muestras que se van a cultivar deben colocarse en el tubo de cultivo, y las muestras para el análisis de orina de rutina, en el tubo destinado para el análisis de orina. Los conservantes que interfieren con cualquiera de las pruebas químicas incluidas en el análisis de orina de rutina no son aceptables. Dado que los tubos de preservación son bastante pequeños, se debe proporcionar un recipiente de recolección adecuado al paciente para la recolección de la muestra, y la orina debe mezclarse bien y verterse en el tubo de preservación, lo que introduce una posibilidad de error de procesamiento, más el costo adicional de los contenedores.,

muchos de los cambios que ocurren en la orina almacenada a temperatura ambiente se relacionan con la multiplicación de bacterias. Los conservantes para el análisis de orina, incluida la refrigeración, generalmente funcionan inhibiendo el crecimiento bacteriano. El uso de estos conservantes químicos resulta en un espécimen que no es adecuado para el cultivo. Los cambios incluyen un aumento en el pH urinario a medida que la urea se descompone en amoníaco. Además, los yesos tienden a descomponerse y los glóbulos rojos sufren hemólisis. La turbidez aumenta debido al crecimiento de bacterias., El nivel de glucosa disminuye debido al metabolismo de las bacterias, mientras que los nitratos se convierten en nitrito a través de la acción de las bacterias.

otros cambios incluyen un oscurecimiento del color de la orina, debido a la oxidación de cromógenos incoloros, como la oxidación de urobilinógeno a urobilina, o un cambio en el color como la bilirrubina se oxida a biliverdina. En las urinas alcalinas de baja gravedad específica, las células y los moldes comienzan a lisarse. Los leucocitos están especialmente sujetos a lisis ya que la orina se encuentra a temperatura ambiente., Si las muestras de orina contienen glucosa, la presencia de leucocitos dará lugar a una disminución de los niveles de glucosa debido al metabolismo de las células. Si las cetonas están presentes, el nivel disminuirá a medida que la acetona se convierte en agua y dióxido de carbono o la cetona se volatiliza.

En resumen, la refrigeración parece ser la mejor solución cuando el análisis de orina no se puede realizar dentro de las dos horas posteriores a la recolección., Su recomendación de que todas las muestras se colocan en refrigeradores que contienen paquetes de congelación hasta que se llevan a la sección de análisis de orina (suponiendo que es imposible refrigerar las muestras en el sitio de recolección) parece ser una alternativa aceptable al examen dentro de las dos horas de la recolección.

Karen M.
Ringsrud, MT (ASCP)
Assistant Professor
Dept. de Medicina de laboratorio y Patología
Escuela de Medicina de la Universidad de Minnesota

referencia

1. NCCLS. Urinalysis and Collection, Transportation, and Preservation of Urine Specimens: Approved Guidelines (en inglés)., Villanova, PA: National Committee for Clinical Laboratory
Standards;2001; 21 (19): GP16-A2.

documentación de flora Normal

P: ¿estamos obligados a documentar los resultados de cultivo sin crecimiento o flora normal en la hoja de trabajo de cultivo, o podemos emitir el informe sin documentación?

A: la respuesta a esta pregunta está vinculada a la necesidad de una hoja de trabajo de Cultura. La hoja de trabajo, ya sea en papel o en una computadora, cumple dos funciones., En primer lugar, la hoja de trabajo proporciona documentación de todo el trabajo realizado en la cultura por individuos anteriores, y en segundo lugar, proporciona la información necesaria para reconstruir el trabajo realizado en la cultura meses o años después.

Por lo tanto, la hoja de trabajo debe registrar de manera clara y precisa todas las observaciones, frotis, resultados de las pruebas, llamadas telefónicas a los proveedores y acciones tomadas en cada paso del trabajo de cultivo según lo requiere el manual de procedimientos. El manual de procedimiento determina el alcance de la documentación requerida., Por ejemplo, cuando el manual de procedimientos establece que se utiliza una prueba de solubilidad biliar para diferenciar Streptococcus pneumoniae de estreptococos viridans en cultivos de esputo, los resultados de esa prueba deben registrarse en la hoja de trabajo. O bien, cuando el procedimiento requiera el examen de la placa de cultivo cada día durante tres días, debe hacerse una anotación que indique que se han realizado los exámenes necesarios. Estas anotaciones ayudan a los diferentes individuos que pueden trabajar en la misma cultura., A menudo, la documentación de los resultados negativos en la hoja de trabajo parece ser una pérdida de tiempo precioso, pero sirve como un registro de que el informe de cultivo es correcto basado en el trabajo realizado de acuerdo con el procedimiento de laboratorio aceptado.

David Sewell, Ph. D., ABMM
Director de Microbiología
Veterans Affairs Medical Center
Portland, OR

quantitative body fluid counts

p: Actualmente ofrecemos recuentos celulares en fluidos como fluidos cefalorraquídeos, paracenteses, fluidos sinoviales y otros fluidos., Puedo ver la importancia de informar los recuentos de glóbulos blancos y glóbulos rojos en los fluidos cefalorraquídeos, pero ¿qué tan importante es un recuento de células para los otros fluidos? Es aceptable reportar recuentos de células semicuantitativamente, por ejemplo, RBC 1+, 2+, etc., para este tipo de fluidos?

A: actualmente, se recomienda que los recuentos celulares en fluidos espinales se determinen cuantitativamente, en lugar de solo estimarse como 1+, 2+, etc.1 Esto se debe a que las definiciones de tales intervalos semicuantitativos aún no están estandarizadas; por lo tanto, las comparaciones con los informes de la literatura podrían ser problemáticas., El examen de los fluidos espinales en busca de evidencia de infección, incluyendo bacteriana vs.viral, o hemorragia cerebral, es particularmente importante para la atención del paciente. Existe la tentación de hacer los recuentos cuantitativos de células en un analizador de Hematología, aunque los fabricantes pueden no recomendar ese método. Pero con la mayor exactitud y precisión de estos contadores, esperaría que los estudios contemporáneos obviaran esta objeción. Además, el desarrollo de técnicas de citocentrifugación para fluidos espinales, así como otros fluidos corporales, hace que este método sea muy atractivo para el conteo diferencial., Sin embargo, existen las necesidades de comprar y mantener un equipo adicional y la compra de dispositivos desechables para la preparación de portaobjetos microscópicos.

los recuentos cuantitativos de células en otros líquidos, como la orina, tienen beneficios considerables. Curiosamente, los laboratorios de Microbiología ahora están utilizando estimaciones precisas de los recuentos celulares en el análisis de orina para decidir qué muestras de orina deben cultivarse, y se han logrado ahorros significativos de tiempo y recursos., Como las cuentas en otros fluidos mejoran, esperemos que se encuentren mejoras similares para otros exámenes de fluidos.

Por supuesto, además del conteo cuantitativo, la morfología también es importante. Los fluidos sinoviales ocasionalmente se presentan para el examen y la identificación de cualquier cristal diagnóstico, como podría verse en la gota u otros tipos de artritis. Todos estos fluidos pueden posiblemente contener células malignas; por lo tanto, la posibilidad de tales células debe tenerse en cuenta. John A. Koepke, M. D.,
Profesor Emérito de patología
Duke University Medical Center
Durham, NC

referencia