Pytanie 1. Co to jest QuantiFERON ® – TB Gold Plus?

Test QuantiFERON-TB Gold Plus (QFT-Plus) jest testem diagnostycznym in vitro, który wykorzystuje koktajl peptydowy symulujący białka ESAT – 6 i CFP-10 do stymulowania komórek w heparynizowanej krwi pełnej. Wykrywanie interferonu-γ (IFN-γ) za pomocą testu immunosorbentu enzymatycznego (ELISA) służy do identyfikacji in vitro odpowiedzi na te antygeny peptydowe, które są związane z zakażeniem Mycobacterium tuberculosis. QFT-Plus jest testem pośrednim dla M., zakażenie gruźlicą (w tym chorobą) i jest przeznaczony do stosowania w połączeniu z oceną ryzyka, radiografią i innymi badaniami medycznymi i diagnostycznymi. Ten test nie odróżnia utajonej i aktywnej gruźlicy.1

zalecenia CDC stwierdzają,że 2, 3

  • IGRAs może być stosowany zamiast (ale nie jako uzupełnienie) TST we wszystkich sytuacjach, w których CDC zaleca TST jako pomoc w diagnozowaniu zakażeń gruźlicą u dorosłych.
  • „IGRA jest preferowana do badania osób, które otrzymały Bacillus Calmette-Guérin (BCG) jako szczepionkę lub do leczenia raka.,”
  • ” IGRA lub TST mogą być stosowane bez preferencji do badania ostatnich kontaktów osób znanych lub podejrzewanych o czynną gruźlicę ze szczególnym uwzględnieniem badań kontrolnych. IGRAs oferuje możliwość wykrywania zakażenia gruźlicą M o większej swoistości niż w przypadku TST. Jeśli IGRAs ma być stosowany w badaniach kontaktowych, negatywne wyniki uzyskane przed 8 tygodniami po zakończeniu ekspozycji zazwyczaj powinny być potwierdzone przez powtórzenie testów 8 do 10 tygodni po zakończeniu ekspozycji.,”

aktualne ostrzeżenia dotyczące produktów i inne informacje można znaleźć na stronie www.QuantiFERON.com.

Pytanie 2. Jak działa QuantiFERON-TB Gold Plus?

Test QuantiFERON-TB Gold Plus jest badaniem krwi w kierunku zakażenia gruźlicą M, które opiera się na pomiarze odpowiedzi immunologicznej (CMI) zależnej od komórek. Koktajl peptydowy symulujący białka prątków ESAT – 6 i CFP-10 stymuluje komórki T pacjenta in vitro do uwalniania IFN-γ, co jest następnie mierzone za pomocą technologii testu immunosorbentu enzymatycznego (ELISA)., Test wykrywa infekcje wytwarzane przez kompleks gruźlicy M, w tym gruźlicę m, a także niektóre prątki bez gruźlicy, w tym M kansasii, m szulgai I m marinum. Szczepy BCG i większość innych prątków bez gruźlicy nie zawierają białek ESAT-6 i CFP-10; dlatego też u pacjentów zaszczepionych BCG lub zakażonych większością prątków środowiskowych wynik testu powinien być negatywny. Wyniki należy zawsze interpretować w połączeniu z innymi wynikami klinicznymi i laboratoryjnymi.

pytanie 3. Jakie są zalety QuantiFERON-TB Gold Plus nad TST?,

  • Wyniki nie podlegają uprzedzeniom czytelnika
  • dokładność nie ma wpływu na wcześniejsze szczepienie BCG
  • wymaga tylko 1 wizyty pacjenta (2-4 wymagane dla TST)
  • skrócony czas personelu i unikanie niepotrzebnych obserwacji, dodatkowego leczenia i leczenia z powodu fałszywie pozytywnych wyników TST2

Pytanie 4. Jak interpretuje Pan raport QuantiFERON-TB Gold Plus?,

przykład raportu QuantiFERON-TB Gold Plus przedstawiono poniżej:

  • Nil lub ujemna probówka kontrolna (szara Czapka)
    wartość nil pochodzi z ujemnej probówki kontrolnej, która nie zawiera dodatków; jest używana do określenia, czy pacjent ma wcześniej istniejącą odpowiedź immunologiczną (np.-produkcja γ), co może spowodować fałszywie dodatni odczyt w teście.

aby badanie było ważne, probówka nil musi mieć wartość ≤8, 0 J.M. / mL., W powyższym przykładzie wartość zerowa (0,07 J.M./mL) mieści się w zalecanym zakresie ≤8,0 J. M./mL. Wartość zerowa rury jest odejmowana od wartości rur mitogenu, TB1 i TB2 dla końcowego wyniku odpowiednich rur.

  • Mitogen lub pozytywna Rura kontrolna (fioletowa Czapka)
    mitogen, lub pozytywna rura kontrolna, zawiera mitogen (fitohemaglutynina-P), który jest nieswoistym stymulatorem limfocytów T. Jest on stosowany w celu zapewnienia, że limfocyty T pacjenta są zdolne do wytwarzania IFN-γ, a także służy jako kontrola prawidłowego obchodzenia się z krwią i inkubacji., Rurka mitogenu jest również używana do wykrywania fałszywie ujemnych odczytów.

aby badanie było ważne, probówka mitogenu musi mieć wartość IFN-γ co najmniej 0,5 J.M. / mL wyższą niż wartość probówki nil. Oznacza to, że test działa prawidłowo.

w przytoczonym powyżej przykładzie wartość probówki mitogenu pomniejszona o wartość probówki zerowej znacznie przekracza minimalny punkt przerwania wynoszący 0,5 J.M. / mL.,

  • antygen TB1 (green cap)
    wnętrze tej tubki pokryte jest antygenami specyficznymi dla gruźlicy M przeznaczonymi do wywoływania odpowiedzi CMI z limfocytów T-pomocniczych CD4+.

  • antygen TB2 (Yellow cap)
    wnętrze tubki jest pokryte antygenami specyficznymi dla gruźlicy m, zaprojektowanymi do wywoływania odpowiedzi CMI z limfocytów T-pomocniczych CD4+, a także zawiera dodatkowy zestaw peptydów ukierunkowanych na indukcję odpowiedzi CMI z cytotoksycznych limfocytów T CD8+.,

  • ocena wyniku
    wyniki z każdej z 4 rur są oceniane zgodnie z poniższym algorytmem, zapewniając wynik końcowy:

Obliczanie dodatniej, ujemnej lub nieokreślonej
IFN-γ wytwarzanego przez każdą probówkę (Nil, mitogen, antygen TB1 i tb2) mierzy się przy użyciu standardowego formatu Elisa. Wyniki QuantiFERON-TB Gold Plus są oparte na ilości IFN-γ, która jest uwalniana w odpowiedzi na antygeny., Wynik „ujemny” lub „dodatni” jest obliczany na podstawie tych wartości za pomocą zatwierdzonego przez FDA algorytmu uruchamianego na oprogramowaniu QuantiFERON. „Nieokreślone” wyniki są generowane, gdy jedna z probówek kontrolnych (nil lub mitogen) nie wytwarza zamierzonych wartości.

na ulotce dołączonej do opakowania, „wielkość mierzonego poziomu IFN-γ nie może być skorelowana z stadium lub stopniem zakażenia, poziomem odpowiedzi immunologicznej lub prawdopodobieństwem progresji do aktywnej choroby. Pozytywna odpowiedź na gruźlicę u osób ujemnych na mitogen jest rzadka, ale obserwowano ją u pacjentów z chorobą gruźlicy., Oznacza to, że odpowiedź IFN-γ na antygeny TB jest większa niż odpowiedź na mitogen, co jest możliwe, ponieważ poziom Mitogenu nie stymuluje maksymalnie produkcji IFN-γ przez limfocyty.”4

Pytanie 5. Czym są nawrócenie i rewersja?

Konwersja: w odniesieniu do antygenów TB konwersja jest punktem, w którym IFN-γ staje się wykrywalny powyżej ustalonego progu lub odcięcia od poprzedniego ujemnego lub nieznanego wyniku.

Rewersja: odwrotność konwersji—wynik, który przechodzi od góry ustalonego odcięcia do dołu odcięcia (dodatniego do ujemnego)., Chociaż nie ma danych uzyskanych za pomocą testu QuantiFERON-TB Gold Plus, istnieją liczne publikacje na temat konwersji / rewersji w oparciu o test QuantiFERON-TB Gold.

w jednym badaniu Quantiferon-TB Gold, wśród osób z ilościowymi wartościami IFN-γ tuż powyżej lub tuż poniżej progu odcięcia, rewersje i konwersje były powszechne.Jeżeli nie podejrzewa się powikłanego zakażenia gruźlicą, należy przed rozpoczęciem leczenia potwierdzić dodatni wynik QuantiFERON-TB Gold Plustest tą samą lub alternatywną metodą.

pytanie 6., Co powoduje nieokreśloną odpowiedź?,

  • Brak odpowiedzi na fitohemaglutyninę (rzadko, <1 na 1000 pacjentów)
  • Przechowywanie wypełnionych probówek do pobierania krwi poza zalecanym zakresem temperatur
  • upośledzone probówki do transportu mitogenu
  • niewystarczające limfocyty
  • niezdolność limfocytów pacjenta do generowania IFN-γ
  • terapie immunomodulujące, zwłaszcza u pacjentów, którzy otrzymują również duże dawki sterydów
  • w przypadku uzyskania nieokreślonego wyniku, lekarz może zdecydować się na przerysowanie próbki lub przeprowadzenie innych procedur, stosownie do potrzeb.,1

    pytanie 7. Czy QuantiFERON-TB Gold Plus testing może być stosowany do monitorowania terapii gruźlicy?

    nie Badania QuantiFERON-TB Gold Plus nie mogą być wykorzystywane do monitorowania leczenia gruźlicy.6

    pytanie 8. Czy wcześniejsze TST wpływa na wynik QuantiFERON-TB Gold Plus?

    tak, wcześniejsze TST może zwiększyć wyniki IGRA. Jednak zwiększenie nie występuje u niezakażonych osób, ponieważ nie mają one ustalonej odpowiedzi immunologicznej na gruźlicę. Ponadto, TST, pomimo jego stosowania in vivo, nie powoduje uczulenia lub ustanowienia odpowiedzi komórkowej., Dlatego nie może powodować późniejszego zwiększenia wśród osób bez wcześniejszego zakażenia gruźlicą. Skutki wzmocnionej reakcji nie są znane. Uważa się jednak, że zwiększona odpowiedź odzwierciedla indukcję słabej odpowiedzi pamięciowej z wielu punktów stymulacji. Zwiększenie jest powszechnym zjawiskiem, gdy TST jest powtarzany. Każdy TST może zwiększyć kolejne odpowiedzi TST, z powodu zdalnego zakażenia gruźlicą, a także zakażenia prątkami bez gruźlicy lub szczepienia BCG.1,7,8

    pytanie 9. Czy IGRAs można podawać osobom otrzymującym szczepienia?,

    nie badano wpływu szczepień przeciwko żywym wirusom na IGRAs. Zaleca się jednak pobranie preparatu IGRA tego samego dnia co szczepienie lub 4 do 6 tygodni po podaniu szczepionki zawierającej żywy wirus.

    pytanie 10. Czy IGRA może być stosowana u dzieci?

    tak. Igra może być stosowana u dzieci w wieku 2 lat lub starszych. Jest on preferowany u dzieci, które otrzymały szczepionkę BCG lub prawdopodobnie nie powrócą do odczytu TST. Dla dzieci poniżej 2 roku życia, TST jest preferowanym testem do wykrywania zakażenia gruźlicą.,9

    1. FAQ dla pracowników służby zdrowia: QuantiFERON®-TB Gold Plus. Strona QuantiFERON. www.quantiferon.com/wp-content/uploads/2017/10/PROM-11178-001_1107769_BRO-QFT-TB-Gold-Plus-FAQ-HCPs-0717-US.pdf. opublikowane w lipcu 2017. [2010-06-18 19: 48]
    2. Lewinsohn DM, Leonard MK, LoBue PA, et al. Official American Thoracic Society / Infectious Diseases Society of America / Centers for Disease Control and Prevention clinical practice guidelines: diagnosis of tuberculosis in adults and children. / Align = „Left” / 2017; 64: e1-e33.
    3. Mazurek GH, Jereb J, Vernon A, i in., Updated guidelines for using interferon gamma release assays to detect Mycobacterium tuberculosisinfection—Stany Zjednoczone, 2010. MMWR Recomm Rep. 2010; 59:1-25.
    4. wkładki pakietów QFT-Plus. Strona QuantiFERON.https://www.quantiferon.com/us/products/quantiferon-tb-gold-plus-us/package-inserts. [2010-06-18 19: 48]
    5. Dorman SE, Belknap R, Graviss EA, et al. Interferon-grelease assays i tuberkulinowe testy skórne w diagnostyce utajonej gruźlicy u pracowników służby zdrowia w Stanach Zjednoczonych. Am J Respir Crit Care Med. 2014;189:77-87.
    6. , Ocena wpływu leczenia utajonej gruźlicy na wyniki testu QuantiFERON-TB Gold. Infect Control Hosp Epidemiol. 2009;30:392-395.
    7. King TC, Upfal M, Gottlieb A, et al. MIEJSCE.Skuteczność testu uwalniania interferonu-γ w badaniach przesiewowych pracowników służby zdrowia w dziewiętnastu amerykańskich szpitalach. Am J Resp Crit Care Med. 2015;192:367-373.
    8. van Zyl-Smit RN, Zwerling A, Dheda K, et al. Zmienność wewnątrzosobnicza wyników testu interferonu-g w kierunku gruźlicy i zwiększenia efektu tuberkulinowej próby skórnej: przegląd systematyczny. PLoS 1. 2009; 4(12):e8517. podoba mi się! do obserwowanych nr:101371,pone.0008517
    9. Gruźlica. W: Kimberlin DW, Brady MT, Jackson MA, et al, eds. Red Book: 2018 Sprawozdanie Komisji chorób zakaźnych. 31st ed. Itasca, IL: American Academy of Pediatrics; 2018: 829-853.