Domanda 1. Che cos’è QuantiFERON ® – TB Gold Plus?
Il dosaggio QuantiFERON-TB Gold Plus (QFT-Plus) è un test diagnostico in vitro che utilizza un cocktail peptidico che simula le proteine ESAT-6 e CFP-10 per stimolare le cellule nel sangue intero eparinizzato. La rilevazione di interferone-γ (IFN-γ) mediante saggio immunoassorbente legato all’enzima (ELISA) viene utilizzata per identificare le risposte in vitro a questi antigeni peptidici associati all’infezione da Mycobacterium tuberculosis. QFT-Plus è un test indiretto per M., infezione da tubercolosi (inclusa la malattia) ed è destinato all’uso in combinazione con la valutazione del rischio, la radiografia e altre valutazioni mediche e diagnostiche. Questo test non distingue tra TB latente e attiva.1
Le raccomandazioni del CDC affermano che2,3
- IGRA può essere utilizzato al posto di (ma non in aggiunta a) un TST in tutte le situazioni in cui CDC raccomanda TST come aiuto nella diagnosi di infezioni da tubercolosi negli adulti.
- ” Un IGRA è preferito per testare le persone che hanno ricevuto Bacillus Calmette-Guérin (BCG) come vaccino o per la terapia del cancro.,”
- ” Un IGRA o un TST possono essere utilizzati senza preferenza per testare contatti recenti di persone note o sospettate di avere tubercolosi attiva con considerazioni speciali per i test di follow-up. IGRA offre la possibilità di rilevare l’infezione da tubercolosi M con maggiore specificità rispetto a un TST. Se le IGRA devono essere utilizzate nelle indagini a contatto, i risultati negativi ottenuti prima di 8 settimane dopo la fine dell’esposizione in genere devono essere confermati da test ripetuti da 8 a 10 settimane dopo la fine dell’esposizione.,”
Avvertenze aggiornate specifiche del prodotto e altre informazioni sono disponibili all’indirizzo www.QuantiFERON.com.
Domanda 2. Come funziona QuantiFERON-TB Gold Plus?
Il dosaggio QuantiFERON-TB Gold Plus è un esame del sangue per l’infezione da tubercolosi M che si basa sulla misurazione di una risposta immunitaria cellulo-mediata (CMI). Un cocktail peptidico che simula le proteine micobatteriche ESAT-6 e CFP-10 stimola le cellule T del paziente in vitro a rilasciare IFN-γ, che viene quindi misurato utilizzando la tecnologia ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)., Il test rileva le infezioni prodotte dal complesso M tuberculosis, che include M tuberculosis, così come alcuni micobatteri non tubercolari, tra cui M kansasii, M szulgai e M marinum. I ceppi di BCG e la maggior parte di altri micobatteri non tubercolari non contengono proteine ESAT-6 e CFP-10; pertanto, i pazienti vaccinati con BCG o infettati con la maggior parte dei micobatteri ambientali dovrebbero risultare negativi. I risultati devono sempre essere interpretati in combinazione con altri risultati clinici e di laboratorio.
Domanda 3. Quali sono i vantaggi di QuantiFERON-TB Gold Plus rispetto a TST?,
- I risultati non sono soggetti a pregiudizi del lettore
- La precisione non è influenzata dalla precedente vaccinazione BCG
- Richiede solo 1 visita del paziente (2-4 richieste per TST)
- Riduzione del tempo del personale ed evitamento di follow-up non necessari, trattamento aggiuntivo e trattamento a causa di risultati TST falsi positivi2
Domanda 4. Come interpreta il rapporto QuantiFERON-TB Gold Plus?,
Un esempio di un QuantiFERON-TB Gold Plus report è mostrato di seguito:
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Nullo o Negativo del Controllo Provetta (tappo grigio)
nil valore deriva dal controllo negativo tubo, che non contiene additivi; esso viene utilizzato per determinare se il paziente ha un preesistente risposta immunitaria (ad esempio, da anticorpi eterofili effetti o non-specifica produzione di IFN-γ), che può causare un falso positivo lettura del test.
Affinché un test sia valido, la provetta nil deve avere un valore ≤8,0 UI/mL., Nell’esempio sopra citato, il valore zero (0,07 UI / mL) è ben compreso nell’intervallo raccomandato di ≤8,0 UI/mL. Il valore del tubo nil viene sottratto dai valori dei tubi mitogen, TB1 e TB2 per il risultato finale dei rispettivi tubi.
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Mitogeno o tubo di controllo positivo (tappo viola)
Il mitogeno, o tubo di controllo positivo, contiene un mitogeno (fitoemagglutinina-P), che è uno stimolatore non specifico delle cellule T. Viene utilizzato per assicurare che le cellule T del paziente siano in grado di produrre IFN-γ e serve anche come controllo per la corretta manipolazione e incubazione del sangue., Il tubo mitogeno viene anche utilizzato per rilevare letture false-negative.
Affinché un test sia valido, la provetta mitogena deve avere un valore IFN-γ di almeno 0,5 UI/mL superiore al valore della provetta nil. Ciò indica che il test funziona correttamente.
Nell’esempio sopra citato, il valore del tubo mitogeno meno il valore del tubo nil è ben al di sopra del punto di interruzione minimo di 0,5 UI / mL.,
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Antigene TB1 (tappo verde)
L’interno di questo tubo è rivestito con antigeni specifici della tubercolosi M progettati per suscitare risposte CMI dai linfociti T-helper CD4+.
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Antigene TB2(cappuccio giallo)
L’interno di questo tubo è rivestito con gli antigeni specifici della tubercolosi M progettati per suscitare risposte CMI dai linfociti T-helper CD4+ e contiene anche un ulteriore set di peptidi mirati all’induzione delle risposte CMI dai linfociti T citotossici CD8+.,
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Risultati della Valutazione
Risultati da ciascuno dei 4 tubi sono valutate in conformità con l’algoritmo sottostante, fornendo un risultato finale:
Calcolo Positivi, Negativi, o Indeterminato
La quantità di IFN-γ, prodotte da ciascun tubo (nil, chinasi di proteina mitogene, TB1 e TB2 antigene) è misurata utilizzando uno standard di formato ELISA. QuantiFERON-TB Gold Plus risultati si basano sulla quantità di IFN-γ che viene rilasciato in risposta agli antigeni., Il risultato “Negativo” o” Positivo ” viene calcolato da questi valori utilizzando un algoritmo approvato dalla FDA eseguito sul software QuantiFERON. I risultati “indeterminati” vengono generati quando una delle provette di controllo (nil o mitogen) non produce i valori previsti.
Per il foglietto illustrativo, “L’entità del livello di IFN-γ misurato non può essere correlata allo stadio o al grado di infezione, al livello di risposta immunitaria o alla probabilità di progressione a malattia attiva. Una risposta positiva alla TBC in soggetti negativi al mitogeno è rara, ma è stata osservata in pazienti affetti da TBC., Ciò indica che la risposta IFN-γ agli antigeni TB è maggiore di quella al mitogeno, il che è possibile in quanto il livello di Mitogeno non stimola al massimo la produzione di IFN-γ da parte dei linfociti.”4
Domanda 5. Cosa sono conversione e reversione?
Conversione: Rispetto agli antigeni TB, la conversione è il punto in cui IFN-γ diventa rilevabile al di sopra della soglia stabilita o cutoff da un precedente risultato negativo o sconosciuto.
Reversione: l’opposto della conversione-un risultato che va da sopra il cutoff stabilito a sotto il cutoff (da positivo a negativo)., Mentre non ci sono dati derivati utilizzando il test QuantiFERON-TB Gold Plus, ci sono numerose pubblicazioni sulla conversione / reversione basate sul test QuantiFERON-TB Gold.
In uno studio del test QuantiFERON-TB Gold, tra gli individui con valori quantitativi IFN-γ appena sopra o appena sotto la soglia di cut-off, le reversioni e le conversioni erano comuni.5 Per il foglietto illustrativo, è prudente confermare un positivo QuantiFERON-TB Gold Plustest con lo stesso metodo o con un metodo alternativo prima di iniziare la terapia se non si sospetta un’infezione del complesso M tuberculosis.
Domanda 6., Cosa causa una risposta indeterminata?,rthritis, ecc)
Se un risultato indeterminato è ottenuto, il medico può scegliere di prelevare un campione o di eseguire altre procedure, come appropriato.,1
Domanda 7. QuantiFERON-TB Gold Plus test può essere utilizzato per monitorare la terapia TB?
N. Il test QuantiFERON-TB Gold Plus non può essere utilizzato per monitorare la terapia TB.6
Domanda 8. Il TST precedente influisce su un risultato QuantiFERON-TB Gold Plus?
Sì, un TST precedente può aumentare i risultati IGRA. Tuttavia, l’amplificazione non accade in individui non infetti, perché non hanno una risposta immunitaria stabilita a TB. Inoltre, il TST, nonostante la sua applicazione in vivo, non causa sensibilizzazione o stabilisce una risposta cellulo-mediata., Di conseguenza, non può causare l’amplificazione successiva fra le persone senza infezione precedente di TB. Le implicazioni di una risposta potenziata sono sconosciute. Tuttavia, si pensa che una risposta potenziata rifletta l’induzione di una risposta di memoria debole da più punti di stimolazione. Il potenziamento è un fenomeno comune quando si ripete un TST. Ogni TST può amplificare le risposte successive di TST, dovuto l’infezione a distanza di TB come pure l’infezione con i micobatteri non tubercolari o la vaccinazione con BCG.1,7,8
Domanda 9. IGRA può essere somministrato a persone che ricevono vaccinazioni?,
L’effetto della vaccinazione con virus vivi su IGRA non è stato studiato. Tuttavia, è consigliabile prelevare l’IGRA lo stesso giorno della vaccinazione o 4-6 settimane dopo la somministrazione di un vaccino a virus vivo.
Domanda 10. Un IGRA può essere usato per i bambini?
Sì. Un IGRA può essere usato per i bambini di età pari o superiore a 2 anni. È preferibile per i bambini che hanno avuto il vaccino BCG o è improbabile che ritornino per la lettura di un TST. Per i bambini di età inferiore ai 2 anni, il TST è il test preferito per rilevare l’infezione da TB.,9
- Domande frequenti per gli operatori sanitari: QuantiFERON®-TB Gold Plus. Sito QuantiFERON. www.quantiferon.com/wp-content/uploads/2017/10/PROM-11178-001_1107769_BRO-QFT-TB-Gold-Plus-FAQ-HCPs-0717-US.pdf. Pubblicato luglio 2017. Accesso giugno 2018.
- Lewinsohn DM, Leonard MK, LoBue PA, et al. Official American Thoracic Society / Infectious Diseases Society of America / Centers for Disease Control and Prevention clinical practice guidelines: diagnosi della tubercolosi negli adulti e nei bambini. Clin Infettare Dis. 2017; 64: e1-e33.
- Mazurek GH, Jereb J, Vernon A, et al., Linee guida aggiornate per l’utilizzo di test di rilascio di interferone gamma per rilevare Mycobacterium tuberculosisinfection-Stati Uniti, 2010. 2010; 59:1-25.
- QFT-Plus Cornici e articoli da esposizione Inserti. Sito QuantiFERON.https://www.quantiferon.com/us/products/quantiferon-tb-gold-plus-us/package-inserts. Accesso giugno 2018.
- Dorman SE, Belknap R, Graviss EA, et al. Test di interferone-grelease e test cutanei alla tubercolina per la diagnosi di infezione da tubercolosi latente negli operatori sanitari negli Stati Uniti. Am J Respir Crit Cura Med. 2014;189:77-87.
- Pollock NR, Kashino SS, Napolitano DR, et al., Valutazione dell’effetto del trattamento dell’infezione tubercolare latente sui risultati del test QuantiFERON-TB Gold. Infettare il controllo Hosp Epidemiol. 2009;30:392-395.
- Re TC, Upfal M, Gottlieb A, et al. T-SPOT.Prestazioni del test di rilascio di interferone-γ TB nello screening degli operatori sanitari in diciannove ospedali statunitensi. Am J Resp Crit Cura Med. 2015;192:367-373.
- van Zyl-Smit RN, Zwerling A, Dheda K, et al. Variabilità all’interno del soggetto dei risultati del test di interferone-g per la tubercolosi e l’effetto potenziante del test cutaneo alla tubercolina: una revisione sistematica. PLoS Uno. 2009; 4(12): e8517. doi:10.1371 / giornale.,pone.0008517
- Accademia Americana di Pediatria. Tubercolosi. In: Kimberlin DW, Brady MT, Jackson MA, et al, eds. Libro rosso: Relazione 2018 della Commissione per le malattie infettive. 31a ed. Itasca, IL: American Academy of Pediatrics; 2018: 829-853.