Urasiili N-glycosylase (UNG) on entsyymi, jota käytetään tehokas tapa poistaa kulkeutuvien polymeraasiketjureaktio (PCR) tuotteet, in Real-Time PCR. Tämä menetelmä muuttaa PCR-tuotteet siten, että uusi reaktio, mitään jäljellä tuotteita edellisen PCR lisäyksiä on pilkottu ja estää vahvistamalla, mutta totta DNA-mallit säilyvät ennallaan., PCR syntetisoi runsas vahvistus tuotteiden kunkin kierroksen, mutta saastuminen edelleen kierrosta PCR kanssa pieniä määriä näitä tuotteita, nimeltään carry-over saastuminen, saadaan vääriä positiivisia tuloksia. Carry-over saastumisen joitakin edellisen PCR voi olla merkittävä ongelma, koska sekä runsaasti PCR-tuotteita, ja ihanteellinen rakenne epäpuhtaus materiaali uudelleen vahvistusta., Kuitenkin carry-over saastuminen voidaan ohjata seuraavat kaksi vaihetta: (i) sisältää dUTP kaikissa PCR-tuotteet (korvaamalla dUTP varten dTTP, tai sisällyttämällä urasiili aikana synteesi pohjamaalit; ja (ii) hoitoon kaikki myöhemmät täysin valmiiksi kootun alkaa reaktioita urasiili-DNA-glycosylase (UDG), jonka jälkeen lämpö inaktivointi UDG. UDG irrottaa urasiilin emäksen urasiilia sisältävän DNA: n fosfodiesterirungosta, mutta sillä ei ole vaikutusta luonnolliseen (eli tymiiniä sisältävään) DNA: han., Tuloksena olevat apyrimidiinikohdat estävät DNA-polymeraasien replikaation ja ovat hyvin labiileja happo-emäs hydrolyysiksi. Koska UDG ei reagoi dTTP, ja on myös inaktivoitu kuumentamalla denaturointi ennen varsinaista PCR, kuljettaa-yli kontaminaatio Pcr voidaan ohjata tehokkaasti, jos epäpuhtauksia sisältävät uracils tilalle thymines.
Urasiili N-glycosylase käytettiin myös tutkimuksessa havaita todisteita jatkuva matalan tason aineenvaihdunta ja DNA: n korjaukseen antiikin bakteerit., Pitkän aikavälin selviytymisen bakteerit voivat esiintyä joko endospore muodostumista (jossa bakteeri siirtyy yhteensä lepokauden, joilla ei ole metabolista aktiivisuutta ollenkaan tapahtuu, ja, näin ollen, ei ole DNA: n korjaus), tai muuta kautta, vähentäminen aineenvaihdunta on hyvin alhainen, vain riittävää suorittaa meneillään olevan DNA-korjaus ja estää ehtyminen muita epävakaita molekyylejä (kuten ATP), jossa mikrobi voi korjata vahinkoa sen DNA: ta, mutta myös edelleen hitaasti kuluttaa ravinteita. Ikiroudan bakteerien DNA-sekvenssejä täydennettiin PCR: llä., Yksi sarja toimii monistetaan DNA-sekvenssit, koska-on (tunnistaa kaikki live-bakteerien DNA-näytteistä), kun taas toinen sarja näytti erityisesti DNA: ta, joka oli ollut käynnissä jatkuva korjaus; voit tehdä tämän, DNA käsiteltiin UNG poistaa uracils. Tämä esti vahvistus korjaamatta DNA kahdella tavalla: ensinnäkin, perustoimitukset sivustoja syntyy poistaminen uracils esti DNA-polymeraasi käyttää PCR-jatkamasta ohi sivuston vahinkoa, vaikka nämä perustoimitukset sivustoja myös suoraan heikentynyt DNA: n ja teki sen todennäköisesti fragmentti, kun lämmitys., Näin tutkijat pystyivät osoittamaan näyttöä siitä, että korkean GC-grampositiivisen bakteerin DNA-korjaus on jatkunut jopa 600 000 vuotta vanhana.
Urasiilin glykosylaasia on käytetty myös PCR: n monistettujen DNA-fragmenttien kloonausmenetelmässä. Tässä menetelmässä PCR: ssä käytettävät primerit syntetisoidaan tymiinin sijaan urasiilijäämillä. Kun nämä alukkeet ovat osaksi monistettiin PCR-fragmentit aluke sekvenssi tulee alttiita ruoansulatusta urasiililla N Glycosylase ja tuottaa 3′ ulkonevat päät, jotka voidaan hehkutettu asianmukaisesti valmisteltu vektori-DNA: ta., Tuloksena kimeerinen molekyylejä voidaan muuntaa toimivaltaisten soluja, joilla on korkea hyötysuhde, ilman in vitro-ligaatio.